前言:前段时间,我们介绍了一些免疫组化过程中的常见问题及其预防和处理,以及一些关键试剂,关键步骤的介绍,总的介绍思路:是按照免疫组化的操作流程进行介绍的,如果小伙伴们忘记了,可以先看看前几期的推文,复习一下,因为今天主要是讲解免疫组化的操作流程!以下是正文:
1:烤片,脱蜡→过二甲苯?3(过三遍)→过无水乙醇?5min(无水乙醇浸泡5分钟)→无水乙醇?5min→90%的酒精?5min→80%的酒精?5min→75%的酒精?5min→过双蒸水→pbs浸泡→修复Ag,冷却至常温。
2:过pbs?3min?3→3%过氧化氢封闭→pbs?3min?3→画疏水圈→过pbst→放在湿盒中,加封闭液封闭30min→过一下pbst→滴加一抗→4摄氏度,在湿盒中孵育16小时。
3:37摄氏度复温1小时或30分钟→pbs?3min?3→pbst?3min→在湿盒中加二抗,常温下计时30min→pbs?3min?3→pbst浸泡。
4:DAB显色→过自来水(首缸回收)?3→苏木素7min泡→过自来水?3→浸泡至1%盐酸酒精1秒(偏黄换掉)→自来水?3→自来水冲洗30min→反蓝(显微镜下观察)→晾干→封片。
重磅!免疫组化中一抗的确定以及一抗的使用和前后实验步骤的衔接!
Wx科研风雨路
本文编辑:佚名
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