摘要:目的探索麻杏石甘汤(MaxingShiganDecoction,MSD)通过影响小鼠肺部菌群及趋化因子CCL5和CXCL10表达而防治流感病毒感染的潜在机制。方法通过鼻腔接种法建立A型流感病毒感染小鼠模型,经ig给药或生理盐水3、7d后,计算肺指数和肺指数抑制率,HE染色检测肺组织病理变化,应用免疫组化、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肺组织中CCL5和CXCL10蛋白和mRNA表达变化,并取小鼠肺组织进行16SrRNA基因V3~V4可变区测序、物种注释及聚类,分析Alpha多样性和Beta多样性及组间差异物种,分析CCL5、CXCL10表达与肺部菌群变化的关系。结果给药3d后,模型组肺指数明显高于对照组(P<0.01)和药物组(P<0.05、0.01),肺部炎性细胞浸润明显。麻杏石甘汤组肺部炎性细胞浸润明显减轻,肺指数抑制率与奥司他韦组相似,肺损伤的组织学定量评价指标(IQA)值较模型组明显降低(P<0.01)。模型组CCL5和CXCL10表达明显高于对照组(P<0.01),奥司他韦组和麻杏石甘汤组CCL5和CXCL10表达明显低于模型组(P<0.05、0.01)。16SrRNA基因测序结果显示,模型组拟杆菌属、埃希菌属、变形杆菌属相对丰度增加,粪球菌属相对丰度降低。奥司他韦和麻杏石甘汤能显著降低拟杆菌属、埃希菌属、变形杆菌属相对丰度,增加粪球菌属相对丰度;Alpha多样性分析结果显示各组ACE指数、Chao1指数、Shannon指数比较P>0.05,组间丰富度和多样性无差异。Beta多样性分析结果显示,给药3d后,组间样品点无交集,组间肺菌群构成有差异。各组间有显著性差异物种。Spearman相关性分析显示,CCL5和CXCL10表达与埃希菌属、变形杆菌属、拟杆菌属丰度呈正相关,与粪球菌属丰度呈负相关。给药7d后,各组间肺部菌群结构组成及CCL5、CXCL10表达无显著差异。结论麻杏石甘汤可能通过促进肺部有益菌生长改善肺部微生态环境及免疫微环境,对流感病毒引起的肺损伤有一定的保护作用。
流行性感冒(简称流感)是由流感病毒(influenzaviruses)引起的急性呼吸道传染病。根据其核蛋白和基质蛋白不同,流感病毒分为甲(A)、乙(B)、丙(C)、丁(D)4型,其中A型流感病毒(influenzaAvirus,IAV)是引起人和动物感染的主要病原体[1]。尽管流感常有自限性,但部分患者会发展成急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征,出现呼吸衰竭和多器官损伤,并最终死亡[2]。目前,病毒感染所致的“细胞因子风暴”与肺损伤的相关性被普遍认同[3]。所谓“细胞因子风暴”是指机体免疫系统过度激活引起趋化因子(CC、CXC、C及CX3C家族)和促炎细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-6、IL-12、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、MCP-1和IL-8等)过度释放,初衷是为了清除病毒,但这种自杀式的攻击,也可能诱导全身性炎症反应,引起多器官功能衰竭,甚至死亡[4]。
研究发现,流感病毒可诱导人和动物体内CCL5(CCcehemokineligand5)和CXCL10(C-X-Cmotifchemokine-10)等趋化因子的产生,CCL5和CXCL10在甲型流感病毒感染诱导的小鼠急性肺损伤中发挥重要作用[5-6]。近年来,随着新一代测序技术的应用,肺部微生物群在呼吸系统疾病发生发展中的作用受到
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