常规染色，又称HE染色法，是石蜡切片技术里的基础染色法。苏木素染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
问题1：HE染色经常出现大片白色斑点是什么缘故？如何应对？
原因：由于烤片温度过低、时间过短;石蜡没有完全溶化烘干；脱蜡剂中停留时间过短；脱蜡剂使用过久乏力等，都是造成此现象的原因。
应对方法：如果玻片没有经过烘烤，可先用无水乙醇处理去除玻片上的水分，然后重新用脱蜡剂脱去石蜡。如果熔化烤干不足的现象比较严重，可能导致切片脱落，则无法补救。如果白色斑点是由于切片在二甲苯停留时间不足造成，或使用的二甲苯过久，切片则需退回到二甲苯停留时间相对长些，或更换二甲苯，脱色、漂白，重新染色。
问题2：细胞核染色苍白黯淡（苏木精染色太淡）是什么原因？如何解决？
原因：此类问题可能有3个影响因素，切片在苏木精染色液停留时间过短；苏木精染色液过度氧化，失去染色能力，不能再继续；使用分化步骤处理时间过长，如果是骨组织细胞核黯淡，则多数是由于胶钙造成。
对策：切片重新染色，如果组织在酸性固定液如Zenker、Bouin及中非性缓冲甲醇液固定时间过长，细胞核染色能力将减弱，需增加其在苏木精染色液的时间或用一些方法增加组织的嗜碱性以改善细胞核的着色，例如建议上述组织切片最好使用Weigert铁苏木精染色液，如果组织是用Zenker液固定的可将切片脱蜡后放在5%碳酸氢钠溶液3-4小时，流水冲洗5分钟后染色，如果组织是用Bouin液固定的可将切片脱蜡后放在5%碳酸氢钠溶液1小时，流水冲洗后，10分钟后染色。
问题3：细胞核呈红棕色改变？什么原因？如何补救？
原因：主要是因为苏木精染色液过度氧化，或因为切片在苏木精染液染色后反蓝不足造成的。
对策：首先每次染色之前，检查苏木精染色液的染色能力，发现氧化过度应及时更换，其次可以流动温水或弱碱性溶液如稀氨水0.2%碳酸氢钠等，在苏木精染色后给切片以足够的蓝化时间。
问题4：伊给着色淡？什么原因？如何补救？
原因：伊红染液的PH可能大于5，也可能是蓝化液残留过多，切片太薄或切片经伊红染色后在乙醇脱水时间过长、
对策：检查伊红染液的PH,如果必要的话用乙酸将其调节在4.6-5.0之间，从而使用伊红染色色彩艳丽。确保每次蓝化步骤完成后，使用的弱碱性溶液被充分洗去，玻片上没有残留的弱碱性溶液。检查切片的厚度，脱水时不要让切片在低浓度乙醇停留时间过长，因为含水多的低浓度乙醇会将伊红的颜色分化掉。
问题5：HE染色组织切片中似细小水珠样的杂质是怎么样产生的，如何解决？
原因：这种细小的杂质主要分布在腺体周围，许多人认为此杂质是水珠，是否水珠，要看切片在高倍显微镜是否清楚，若组织细胞结构清晰，就不是脱水不净，可能是封固时切片干涸而造成的细小气泡所致。
对策：脱水不净应乙醇重新脱水；切片干涸应重新在二甲苯中脱胶后再封固。
苏木素-伊红染色液（H-E）苏木素染色液为紫红色液体，无沉淀，略带刺激性气味；伊红染色液为橘红或枣红色液体，无沉淀，略带刺激性气味。
在常温下，经H.E染色液染色组织后，在显微镜下观察细胞核呈蓝色，胞质、间质及各种纤维类呈不同程度的红色，红蓝对比分明、清晰。
预览时标签不可点
